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超濾離心管超濾率受影響因素
更新時間:2020-01-17   點擊次數:1772次
   超濾常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。終目的是較大限度的回收目標溶質。雖然分離效果受到包括化學性質、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會透過,因此在大分子樣品處理中得到了廣泛應用。
  超濾離心管就是一個簡單的可以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用,使用一次就扔掉太浪費。
  離心超濾管會有一個類似于內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內管中),就是超濾的原理。
  超濾離心管超濾率受影響因素
  超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得較好好的效果。濾膜的通量的定義是流量除以面積,使用高 NMWL濾膜可以增加通量,但同時會降低回收率。選擇膜和裝置時需要同時考慮截留分子量和通量。而參與影響通量的因素很多,包括:壓力:較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進行超濾時,流量隨著跨膜壓力(TMP)的增大而增加。正壓條件下操作,如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯,這種因素影響較為明顯。如果極化影響顯著,通量會達到一個平臺,甚至可能隨著壓力的增加而降低。
  濃度:當需要截留的樣品濃度很低時,通量通常不受濃度影響。操作過程中,隨著溶質濃度的升高,增加的粘滯性和極化將導致通量降低。溫度:通常增加操作時的溫度可以提高超濾效率。每增加1℃蛋白擴散率增加3-3.5%,同時溶液粘度降低。實踐中一般是以樣品和設備能耐 受的高溫度來操作。pH:改換溶液和/或pH常常改變分子結構,蛋白尤其如此。在蛋白的pI值蛋白會沉淀,產生堵塞和得率損失。污垢:溶液中除了目的分子造成的濃差極化,還有其它小顆粒和分子會在膜上富集和沉淀,逐漸堆積在膜孔上或膜孔結構中,形成結晶和沉淀。
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